マウスモノクローナル抗体
マウスモノクローナル抗体は、バイオメディカル分野で貴重なツールです。研究から臨床診断まで、さまざまな用途に使用できます。このブログ投稿では、マウスモノクローナル抗体の生産の基礎、そのプロトコルと用途について説明します。モノクローナル抗体とポリクローナル抗体の主な違いは、モノクローナル抗体は単一の特異性を持つことができるため、同じエピトープにのみ結合するのに対し、ポリクローナル抗体は複数のエピトープに結合でき、通常は複数の異なる形質細胞系統によって合成されることです。二重特異性モノクローナル抗体は、1 つのモノクローナル抗体の 2 つのエピトープを別のモノクローナル抗体の結合部位に押し込むことによっても開発できます。
マウスモノクローナル抗体の生産手順 - ハイブリドーマ技術
モノクローナル抗体生産の主なプロトコルは、単一の抗体生産細胞が特異性を持つ 1 種類の抗体のみを生産することです。免疫化によりポリクローナル反応が引き起こされ、さまざまな感受性とアイソタイプを持つ多くの抗体が生産されるため、モノクローナル抗体を得るためには、ポリクローナル反応を誘発する必要があります。ただし、これらの細胞は寿命が限られているため、抗体を生産しない骨髄腫細胞株と交配して、不死かつ抗体生産の両方のハイブリッド細胞を作成する必要があります。がん細胞は本質的に不死であるため、それらを正常細胞と融合させることが考慮されており、この技術はハイブリドーマ技術と呼ばれています。
骨髄腫細胞は、核酸サルベージ合成に必要な酵素であるヒポキサンチン-グアニン-ホスホリボシルトランスフェラーゼ（HGPRT）を作る能力を失っているため、これは考えられます。しかし、ピリミジン合成経路またはHGPRTのいずれかに欠陥がある場合、これらの細胞は成長できません。ジヒドロ葉酸還元酵素を阻害する葉酸類似体であるアミノプテリン、またはDHFRにさらされた細胞は、de novo経路を使用できなくなり、核酸に対して完全に栄養要求性になり、補充が必要になります。
ビタミンが枯渇した培地は、ヒポキサンチン、アミノプテリン、およびチミジンを含むため、HAT培地として知られています。この培地は、融合ハイブリドーマ細胞の増殖に最適です。融合されていない骨髄腫細胞は、HGPRT遺伝子が欠如しているため、DNAを複製できず、増殖できません。融合されていない脾臓細胞は寿命が短いため、無限に増殖することはできません。脾臓細胞は HGPRT を提供し、骨髄腫の仲間は不死化する特性を持っているため、融合ハイブリッドと呼ばれるハイブリッド細胞は培養中に無限に増殖することができます。
モノクローナル抗体の用途
モノクローナル抗体は、喘息、自己免疫疾患、がん、中毒、敗血症、薬物乱用、ウイルス感染、その他さまざまな疾患の潜在的な治療薬として研究されています。
マウスモノクローナル抗体の生産プロトコルは比較的単純でわかりやすいものです。ハイブリドーマ技術は、マウスモノクローナル抗体の生産に使用されます。これには、骨髄腫細胞株と、目的の抗体を生成するリンパ球を融合することが含まれます。次に、選択され培養されたハイブリッド細胞を使用して、目的の抗体を大量に製造します。
モノクローナル抗体は、研究を含むさまざまな目的で使用されています。疾患の過程を研究したり、新しい治療ターゲットを発見したりするために使用できます。マウスモノクローナル抗体は、がんの検出や疾患のモニタリングなどの臨床試験にも使用できます。
マウスモノクローナル抗体の臨床用途には、がんの検出や疾患のモニタリングなどがあります。モノクローナル抗体は、複雑な手順と分子の全体的なサイズ、さらに多額の研究開発費のため、小分子よりも製造コストが高くなります。
がん細胞特異的抗原にのみ結合し、標的のがん細胞に対する免疫系を刺激するモノクローナル抗体は、がん治療の 1 つのタイプです。 Fab 領域で結合して抗原と複合体またはエフェクター細胞を標的とするモノクローナル抗体を設計および製造する能力は、医薬品開発プロセスの一部として活用される可能性があります。このようなモノクローナル抗体は、毒素、放射性同位元素、サイトカイン、またはその他の活性複合体を送達するように変更できるほか、Fab 領域で標的抗原だけでなく複合体またはエフェクター細胞にも結合する二重特異性抗体を設計することもできます。Fc 領域により、すべての完全な抗体は細胞受容体またはその他のタンパク質に結合できます。
例: マウス抗体 muromonab-CD3 から開発された muromonab-CD3 (Orthoclone OKT3)。このアプローチには、マウス抗体にさらされた一部の人がマウス抗体配列に対する免疫反応を起こすという危険性が常にあります。
31st Dec 2024
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